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胎牛血清的選購(gòu)小技巧及檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)

 更新時(shí)間:2022-11-11 點(diǎn)擊量:906
胎牛血清的選購(gòu)小技巧及檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)

胎牛血清 (FBS) 是來(lái)自胎牛的凝結(jié)血液的液體部分,不含細(xì)胞、纖維蛋白和凝血因子,但含有大量對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)至關(guān)重要的營(yíng)養(yǎng)和大分子因子。牛血清白蛋白是FBS 的主要成分。FBS 中的生長(zhǎng)因子對(duì)于培養(yǎng)細(xì)胞的維持和生長(zhǎng)至關(guān)重要。FBS 還含有多種小分子,如氨基酸、糖、脂質(zhì)和激素。
 

FBS 應(yīng)用廣泛。FBS 的主要用途之一是在真核細(xì)胞培養(yǎng)中,其濃度高達(dá) 20% 甚至更高,它提供許多促進(jìn)細(xì)胞存活和增殖的必需營(yíng)養(yǎng)素和生長(zhǎng)因子。然而,需要注意的是,人類(lèi)細(xì)胞培養(yǎng)物中的 FBS  可能會(huì)引入研究成果。用人類(lèi)血清培養(yǎng)的人類(lèi)細(xì)胞與用 FBS 培養(yǎng)的細(xì)胞表現(xiàn)不同。FBS 還用于人類(lèi)和獸用疫苗以及生物技術(shù)藥物的研究、制造和控制,并用于阻止胰蛋白酶消化 或用作冷凍保存中的保護(hù)劑。

胎牛血清


為什么使用胎兒血清而不是新生兒血清或成人血清?

胎兒血清含有較多的生長(zhǎng)因子,丙種球蛋白(即抗體)含量較低,非胎兒血清也有。這些很重要,因?yàn)樯L(zhǎng)因子促進(jìn)細(xì)胞存活和增殖,而抗體可以與培養(yǎng)的細(xì)胞結(jié)合。此外,與成人或新生兒相比,胎兒血清中的補(bǔ)體蛋白(補(bǔ)體)含量較低。這些補(bǔ)體具有溶解培養(yǎng)細(xì)胞和干擾免疫測(cè)定的不良作用。


血清和血漿有什么區(qū)別?

血清和血漿均來(lái)自全血,通過(guò)離心去除包括紅細(xì)胞在內(nèi)的成分。血漿和血清之間的區(qū)別在于,凝血蛋白存在于血漿中,但已從血清中去除。血漿一般是通過(guò)在離心前向血液中加入抗凝劑來(lái)制備的,但不會(huì)去除凝血蛋白。通過(guò)在離心前使血液凝固或通過(guò)廣泛/漸進(jìn)離心來(lái)制備血清。因此,與凝血相關(guān)的纖維蛋白原和蛋白質(zhì)不存在于血清中。


在人類(lèi)中,以下 22 種蛋白質(zhì)占血清和血漿總蛋白質(zhì)含量的 99%:白蛋白、總 IgG、轉(zhuǎn)鐵蛋白、纖維蛋白原、總 IgA 、α-2-巨球蛋白、總 IgM、α-1-抗胰蛋白酶、C3 補(bǔ)體、結(jié)合球蛋白、α-1-酸性糖蛋白、載脂蛋白-B 、載脂蛋白-A1、脂蛋白 (a)、因子 H、銅藍(lán)蛋白、C4 補(bǔ)體、補(bǔ)體因子 B 、前白蛋白、C9  補(bǔ)體、C1q 補(bǔ)體和 C8 補(bǔ)體。剩下的 1% 包括數(shù)百種蛋白質(zhì)。豐富的血清蛋白白蛋白,濃度為 50 mg/ml ,約占總蛋白質(zhì)量的一半。


胎牛血清的檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)是什么?

國(guó)際血清工業(yè)協(xié)會(huì) ISIA是血清供應(yīng)貿(mào)易組織,制定了質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)化指南。這些指南要求使用特定方法進(jìn)行以下測(cè)試,并且測(cè)試結(jié)果必須作為分析證書(shū)提供。

測(cè)試
細(xì)菌和真菌 - 無(wú)菌測(cè)試
支原體
細(xì)胞病變劑 - 病毒檢測(cè)
血液吸附劑 - 病毒檢測(cè)
牛病毒性腹瀉 - 病毒檢測(cè)
pH 測(cè)量
滲透壓
總蛋白, 雙縮脲法測(cè)定
內(nèi)毒素
血紅蛋白
電泳圖
性能測(cè)試,例如干細(xì)胞培養(yǎng)
徑向免疫擴(kuò)散
免疫球蛋白
γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶 (GGT)

 

內(nèi)毒素檢測(cè)

內(nèi)毒素,也稱為脂多糖(LPS)或脂寡糖(LOS),來(lái)自革蘭氏陰性菌的外膜,有助于多種致病性革蘭氏陰性菌的臨床表現(xiàn)。在體內(nèi) ,內(nèi)毒素會(huì)引起發(fā)燒和炎癥反應(yīng),而在細(xì)胞培養(yǎng)中它們會(huì)引起細(xì)胞反應(yīng)的變化。
 

內(nèi)毒素水平通過(guò)鱟變形細(xì)胞裂解物 (LAL) 測(cè)試或較新的合成測(cè)試(稱為重組因子測(cè)定)進(jìn)行測(cè)量。變形細(xì)胞類(lèi)似于脊椎動(dòng)物中的白細(xì)胞,LAL 是由鱟 (美洲鱟;圖 1)的血液制備的。LAL 對(duì)內(nèi)毒素非常敏感,即使存在微量的內(nèi)毒素也會(huì)凝結(jié)。許多鱟種群處于危險(xiǎn)之中,因此應(yīng)注意保護(hù)它們免受 消 失。
 

圖 1.美洲鱟
 

不含外泌體或其他成分的 FBS

常規(guī) FBS 含有大量細(xì)胞外囊泡,其中一些是外泌體。使用培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行外泌體研究時(shí),使用不含外泌體的 FBS 至關(guān)重要。然而,重要的是要意識(shí)到,去除外泌體的 FBS  可能會(huì)以不同于常規(guī) FBS 的方式影響和支持細(xì)胞生長(zhǎng)。去除外泌體的 FBS 可以可以通過(guò)超速離心或超濾制備.
 

蘇州阿爾法生物13年專注于生物實(shí)驗(yàn)室儀器及生物試劑耗材的供應(yīng),阿爾法試劑主要包括:胎牛血清,新生牛血清,培養(yǎng)基,抗體,天根質(zhì)粒小提試劑盒,基因組提取試劑盒,純化試劑盒,一抗、二抗等。