DNA,即脫氧核糖核酸,是構(gòu)成生命基礎(chǔ)的分子。我們可以通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)來(lái)檢測(cè)、分離并研究DNA分子。瓊脂糖凝膠電泳是一種重要的分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)方法,可以幫助我們了解 DNA的結(jié)構(gòu)和功能。本文將帶您了解瓊脂糖凝膠電泳技術(shù),并介紹其在DNA研究中的應(yīng)用。
實(shí)驗(yàn)原理
在瓊脂糖凝膠電泳中,DNA分子會(huì)受到電荷效應(yīng)和分子篩效應(yīng)的影響而遷移。DNA分子在高于其等電點(diǎn)的溶液中具有負(fù)電荷,因此在電場(chǎng)的作用下會(huì)向正極移動(dòng)。所有DNA雙鏈分子幾乎具有相同數(shù)量的凈電荷,因此它們會(huì)以相同的速度向正極移動(dòng)。在一定的電場(chǎng)強(qiáng)度下,DNA分子的遷移速度取決于其大小和構(gòu)型,即分子篩效應(yīng)。具有不同相對(duì)分子質(zhì)量的DNA片段會(huì)以不同速度移動(dòng),從而實(shí)現(xiàn)分離。DNA分子的遷移速度與其相對(duì)分子質(zhì)量的對(duì)數(shù)成反比關(guān)系。利用瓊脂糖凝膠電泳,我們不僅可以分離不同相對(duì)分子質(zhì)量的DNA,還可以分離具有相同相對(duì)分子質(zhì)量但不同構(gòu)型的DNA。
實(shí)驗(yàn)步驟
1. 制備瓊脂糖凝膠:將瓊脂糖溶解在TAE緩沖液中,酸堿平衡后,制備1%的瓊脂糖凝膠液。
2. 準(zhǔn)備膠板:清洗干凈的有機(jī)玻璃槽置于水平位置,并放置樣品梳子。
3. 將制備好的瓊脂糖凝膠液倒入有機(jī)玻璃槽,形成均勻的膠面,并等待凝固。
4. 加樣:將待檢測(cè)的DNA樣品與上樣緩沖液混合后,加入樣品孔中。同時(shí)加入DNA標(biāo)記物作為對(duì)照。
5. 進(jìn)行電泳:連接電泳槽和電源,注意極性(DNA片段由負(fù)極向正極遷移)??刂齐妷汉碗娪緯r(shí)間,確保電泳過(guò)程充分分離DNA片段。
6. 染色:將電泳后的凝膠浸入溴化乙錠溶液中進(jìn)行染色,使DNA片段可見(jiàn)。
7. 觀(guān)察和記錄:在紫外光下觀(guān)察凝膠中的DNA條帶,拍照記錄結(jié)果。
8. 處理凝膠:對(duì)于含有溴化乙錠的凝膠,需采取專(zhuān)門(mén)方法處理,以避免對(duì)環(huán)境造成污染。
應(yīng)用領(lǐng)域
瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)在生物學(xué)研究中有著廣泛的應(yīng)用。以下是一些常見(jiàn)的應(yīng)用領(lǐng)域:
1. DNA分子量測(cè)定:通過(guò)與已知分子量的DNA標(biāo)記物進(jìn)行對(duì)比,可以推斷待測(cè)樣品中DNA片段的相對(duì)分子質(zhì)量。
2. DNA分離與純化:利用瓊脂糖凝膠電泳技術(shù),可以將DNA片段按大小分離,并從凝膠中提取純化。
3. 檢測(cè)基因突變:通過(guò)與正?;蜻M(jìn)行對(duì)比,瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)可以檢測(cè)到某些基因突變,為遺傳學(xué)研究提供依據(jù)。
4. 核酸*交:將特定標(biāo)記的探針與瓊脂糖凝膠中的DNA進(jìn)行*交,可以檢測(cè)特定基因在DNA中的存在與表達(dá)。
5. DNA指紋圖譜:通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳,可以生成DNA條帶圖譜,用于個(gè)體識(shí)別、法醫(yī)學(xué)鑒定和生物學(xué)親緣關(guān)系研究。
瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)是一種重要的分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)方法,廣泛應(yīng)用于DNA的檢測(cè)、分離與研究。通過(guò)本文的介紹,我們對(duì)瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)有了更深入的了解。在今后的科學(xué)研究和實(shí)驗(yàn)中,瓊脂糖凝膠電泳將繼續(xù)發(fā)揮重要的作用,助力我們解開(kāi)DNA之謎。
蘇州阿爾法生物提供的實(shí)驗(yàn)室儀器類(lèi)產(chǎn)品主要有以下幾類(lèi):
1. 實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)箱類(lèi),如CO2培養(yǎng)箱、CO2振蕩搖床、全溫振蕩培養(yǎng)箱、恒溫恒濕培養(yǎng)箱、生化培養(yǎng)箱、霉菌培養(yǎng)箱、BOD培養(yǎng)箱、低溫培養(yǎng)箱等主要品牌為賽默飛、知楚、楚怡。
2. 移液槍類(lèi):這個(gè)類(lèi)目的主要以梅特勒rainin為主,比如:?jiǎn)蔚酪埔浩鳌⒍嗟酪埔浩?、手?dòng)移液器、電動(dòng)移液器、電動(dòng)助吸器、6道移液器、8道排槍移液器、12道排槍還有與之配套的移液吸頭。
3. 發(fā)酵罐、生物反應(yīng)器:這個(gè)主要以楚怡為主。比如一次性生物反應(yīng)器、2聯(lián)發(fā)酵罐、四聯(lián)細(xì)胞生物反應(yīng)器、微載體生物反應(yīng)器等另外接受不同規(guī)格的定制。這款還是挺全的。
4. PCR儀:他們家的PCR儀主要是朗基、BMG、和奧盛三種。朗基的實(shí)驗(yàn)室里用的挺多的。
5. 實(shí)驗(yàn)室離心機(jī)類(lèi):他們的實(shí)驗(yàn)室離心機(jī)主要包括:高速離心機(jī)、臺(tái)式離心機(jī)、迷你離心機(jī)、研磨機(jī)、組織研磨儀、低溫高速離心機(jī)。雖然是國(guó)產(chǎn)品牌,但是性?xún)r(jià)比還是挺不錯(cuò)的,值得推薦。
6. 粉碎研磨儀類(lèi):他們的研磨儀主要儀實(shí)驗(yàn)室研磨、實(shí)驗(yàn)室粉碎機(jī)為主,如:行星式球磨機(jī)、球磨儀、組織研磨儀、旋風(fēng)研磨儀、刀式研磨儀、顎式破碎機(jī)等幾十種粉碎研磨設(shè)備,有的研磨機(jī)出料尺寸甚至達(dá)到納米級(jí)??傊?,這個(gè)品牌是國(guó)產(chǎn)中的姣姣者,性?xún)r(jià)比也還是挺不錯(cuò)的,值得推薦。
7. 乳酸分析儀:這個(gè)是德國(guó)EKF旗下的進(jìn)口品牌,國(guó)外市場(chǎng)挺火,用的也較多,尤其是測(cè)量中試發(fā)酵罐中的細(xì)胞乳酸水平,挺方便。
8. 分子生物學(xué)設(shè)備:這塊主要是天能電泳槽、電泳儀、凝膠成像儀、化學(xué)發(fā)光成像儀、小動(dòng)物活體成像系統(tǒng)等。
9. 其他儀器:還有很多,比如:樂(lè)楓的純水機(jī)、奧盛小離心機(jī)、伯能滅菌器、實(shí)驗(yàn)室洗瓶機(jī)、生物安全柜、超凈臺(tái)、恒溫水浴鍋、旋渦混勻儀、分析天平、低溫冰箱等。還有就不一一列舉了,自己進(jìn)他們看吧,此外,我們還提供移液器、生物反應(yīng)器、發(fā)酵罐、液氮罐、超純水機(jī)、天平、高速離心機(jī)、臺(tái)式離心機(jī)、迷你離心機(jī)、研磨機(jī)、組織研磨儀、低溫高速離心機(jī)潔凈工作臺(tái)等實(shí)驗(yàn)室設(shè)備。
實(shí)驗(yàn)室耗材類(lèi)的主要是NEST吸頭、rainin移液吸頭、濾芯吸頭、PCR管、8連排管、離心管、培養(yǎng)瓶、細(xì)胞培養(yǎng)板、試劑瓶、細(xì)胞小室、細(xì)胞工廠(chǎng)、細(xì)胞網(wǎng)篩等上百種實(shí)驗(yàn)耗材,基本齊全。
實(shí)驗(yàn)試劑主要有:
1.細(xì)胞類(lèi)產(chǎn)品:
各種的腫瘤細(xì)胞、基因編輯細(xì)胞:比如常見(jiàn)的HEK293細(xì)胞、CHO細(xì)胞、骨髓干細(xì)胞、胚胎2.天根試劑盒產(chǎn)品:天根系列試劑盒主要有質(zhì)粒大提、質(zhì)粒小提等各種質(zhì)粒抽提試劑盒、血液DNA提取試劑盒、細(xì)菌DNA提取試劑盒、病毒RNA提取試劑盒、植物組織DNA提取試劑盒等各種基因組提取試劑盒。還有DH5&/TOP-10感受態(tài)等。
3. 其他試劑類(lèi):細(xì)胞培養(yǎng)試劑、分子生物學(xué)試劑、緩沖液、培養(yǎng)基、抗體、碧云天試劑等。
蘇州阿爾法實(shí)驗(yàn)器材有限公司主要 致力于生物實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備,實(shí)驗(yàn)耗材 ,實(shí)驗(yàn)試劑的供應(yīng)服務(wù) 14 年以上,累計(jì)服務(wù) 1000 +客戶(hù)。 在行業(yè)內(nèi)均有不錯(cuò)的口碑。更多瓊脂糖凝膠電泳相關(guān)設(shè)備、電泳儀、電泳槽、凝膠成像等,可以進(jìn)入蘇州阿爾法生物進(jìn)行了解。
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