HPLC分析法也就是高效液相色譜分析法,這種實驗方法更主要用來分離、分析高沸點、熱穩(wěn)定較差及相對分子量比較大的物質(zhì)。主要應(yīng)用領(lǐng)域為核酸類、肽類、內(nèi)酯類、稠環(huán)芳烴類、高聚物類、藥物、人體代謝產(chǎn)物、表面活性劑,抗氧化劑、殺蟲劑等物質(zhì)分析。在HPLC分析實驗中,HPLC分析柱以及分析試劑對實驗的結(jié)果都有著較大的影響。尤其是實驗室純水的指標(biāo),是影響HPLC分析實驗的關(guān)鍵因素。那么經(jīng)常做這種實驗的實驗室選擇哪種 實驗室純水機比較合適呢?
一、實驗室純水中的污染物會對HPLC分析實驗產(chǎn)生哪些影響?
1. 有機物 :實驗用水中若存在部分有機物會降低色譜柱的工作效率,甚至?xí)s短色譜柱的壽命。而且一些有機污染物還容易被電離,在電離時會與樣品產(chǎn)生反應(yīng),從而對實驗結(jié)果造成不良的影響。比如:實驗中常常出現(xiàn)基線漂移,背景噪音過高、圖譜分析發(fā)現(xiàn)較多雜峰等現(xiàn)象,多數(shù)都是因為純水中的有機物所致。
2.離子:純水中的離子主要是酸根離子及礦物離子,這些離子容易與有機試劑結(jié)合形成結(jié)晶鹽,甚至?xí)氯V柱的管路甚至損傷色譜柱;在實驗過程中造成離子疊加峰;部分特殊離子比如:鉀離子等還具有一定的吸收紫外線的能力。
3.顆粒物:顆粒物的危害比較大,因為他的存在可以增大系統(tǒng)被壓,堵塞色譜柱管路,磨損色譜泵從而縮短色譜柱壽命。但一般情況下,在超純水中存在顆粒的顆粒物機率相對不大。
4.微生物 : 微生物也是造成影響HCLP色譜分析法的因素之一,前端進(jìn)水中的微生物如果形成菌膜,將會持續(xù)增殖并產(chǎn)生有機分泌物。這些分泌物會直接影響到實驗結(jié)果。
由此看來,衡量HPLC分析實驗用水的主要指標(biāo)是TOC值和電阻率,當(dāng)TOC值小于10ppb,電阻率值大于等于18.2就可以。對比了實驗室用水中指標(biāo)后發(fā)現(xiàn),只有部分實驗室超純水符合該指標(biāo),普通的雙蒸水、去離子水、桶裝水,甚至于RO純水都不用于HPLC分析實驗。
下圖可以看到各種實驗用水的TOC和電阻率大小情況。
從圖中,我們可以看出,Milli-Q 的超純水,電阻率一般為18.2 MΩ·cm@25 °C,總有機碳 (TOC)小于 5 ppb,這樣的指標(biāo)符合HPLC分析實驗用水的要求,同時也滿足LC-MS、GFAAS、ICP-MS等痕量有機物檢測用水需求。
這樣的實驗室超純水一般采用Milli-Q IQ7000或樂楓Super-GenieG型。這兩種實驗室純水機都可以生實驗室超純水,Super-GenieG型純水機可以一機兩用,同時生產(chǎn)EDI純水和超純水。Super-GenieU智能純水機可以同時生產(chǎn)RO純水和超純水。
Milli-Q IQ7000是密理博生產(chǎn)商新推出的一款純水機。該機型采用了IPAK Meta和IPAK Quanta組合純化柱。以及Jetpore混床離子交換樹脂和創(chuàng)新的IQ nano 離子交換混合填料,可以有效去除水中離子至痕量級。紫外燈的設(shè)計也有所改善,采用了使用氙激發(fā)技術(shù)發(fā)射 172nm波長紫外光的新型紫外燈,使氧化效率大幅提高,從而降低TOC含量,提升水質(zhì)。 并且配置高精度的A10 TOC檢測模塊:TOC值的檢測精確到0.1ppb;另外,配置了多種終端精制器以滿足不同客戶的應(yīng)用需求。
蘇州阿爾法生物提供超純水系統(tǒng)、超純水儀、實驗室純水機 等實驗室超純水設(shè)備,另外還有多種型號的密理博純水產(chǎn)品兼容耗材及配件, 針頭式過濾器,過濾膜、終端過濾器、RO膜及過濾裝置等過濾純化產(chǎn)品為為實驗室提供提供長期穩(wěn)定優(yōu)質(zhì)的實驗室用水,幫助客戶建立實驗室一站式超純水系統(tǒng)、純水供應(yīng)解決方案。